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2022-11-0126319 次瀏覽
干貨|告別繁瑣,15min輕松分離PBMC

耐思再次推出新品


// PBMC

外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cells ,PBMC)是免疫系統(tǒng)的關(guān)鍵組成部分,因此在免疫學(xué)、傳染病、惡性腫瘤、疫苗研發(fā)、移植治療、個(gè)性化醫(yī)學(xué)和毒理學(xué)等領(lǐng)域作為最基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)原料被廣泛使用。

從血液制備PBMC是分離特定免疫細(xì)胞亞群之前常見(jiàn)的一個(gè)步驟。最常用的PBMC分選方法是使用密度梯度離心液進(jìn)行離心。





使用普通離心管分離PBMC的標(biāo)準(zhǔn)流程

聽(tīng)起來(lái)似乎很簡(jiǎn)單,但小心翼翼的加樣、繁瑣的步驟將拉長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)間、增加錯(cuò)誤率。


PBMC分選神器耐思外周血淋巴細(xì)胞分離管




耐思外周血淋巴細(xì)胞分離管通過(guò)獨(dú)特的嵌套幫助你完美避坑。


無(wú)需小心翼翼地加樣 

無(wú)需小心地吸取細(xì)胞白膜層收集細(xì)胞 

避免紅細(xì)胞和粒細(xì)胞再次污染   


短短的15min,通過(guò)離心、傾倒即可完成PBMC分選。




分離管特性 

1.  快速分離,僅需15min即可迅速完成PBMC分選。

2.  操作簡(jiǎn)單,無(wú)需小心而費(fèi)力地將樣本加于密度梯度離心液面,收集PBMCs細(xì)胞時(shí),只需從離心管中簡(jiǎn)單傾倒,無(wú)需其他技術(shù)性的專(zhuān)業(yè)操作。

3.  一致性好,降低錯(cuò)誤,減少不同用戶間的操作差異。

4.  電子束滅菌,SAL=10-6

5.  無(wú)熱源、無(wú)核酸酶


使用方法 

前期準(zhǔn)備

1.  將分離液的溫度平衡至室溫(RT),避光。

2.  樣品準(zhǔn)備:抗凝全血或骨髓。根據(jù)樣本濃度狀態(tài),可適當(dāng)用生理鹽水稀釋?zhuān)岣叻蛛x效果。


分離過(guò)程

1.  將分離液用移液管從分離管嵌套的中心孔中加入:15ml的分離管需要加入約4ml分離液;50ml的分離管需要加入約13ml分離液,確保分離液覆蓋嵌套上方。

2.  將抗凝樣本沿管壁緩慢倒入或用移液管沿管壁緩慢加入到分離管中。

3.  室溫下離心10min,離心力為1200 x g。

4.  收獲PBMCs細(xì)胞,將分離管中上清倒入另一干凈離心管中,分離管中的嵌套能有效避免紅細(xì)胞和粒細(xì)胞再次污染。(注意:離心后傾倒收獲細(xì)胞前,也可先吸取采集或丟棄最上層血漿層,有助于減少細(xì)胞被血小板污染。)

5.  用PBS洗滌PBMCs細(xì)胞,在250 x g離心力下離心10min。

6.  按步驟5重復(fù)洗滌2次,用5ml PBS緩沖液重懸細(xì)胞。


有耐思,實(shí)驗(yàn)so easy!

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