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影響細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果的因素有很多,培養(yǎng)基是細(xì)胞體外生長的營養(yǎng)環(huán)境,決定了培養(yǎng)體系的優(yōu)劣,培養(yǎng)基中的一項(xiàng)重要輔料為牛血清。
細(xì)胞培養(yǎng)中常用的牛血清是一種組分復(fù)雜且尚不完全明確的混合物,含有上千種蛋白質(zhì),提供細(xì)胞生長所需要一些生長因子、激素、貼附因子和營養(yǎng)物質(zhì)。通常在基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基中添加 5%~10% 的牛血清用于細(xì)胞培養(yǎng)。
小牛血清?胎牛血清?新生血清?
細(xì)胞培養(yǎng)究竟用哪個(gè)?
1. 牛血清的分類
2. 胎牛血清的優(yōu)勢
胎牛血清是從牛胎中抽取的血液凝固后剩余的液體部分,通過離心去除細(xì)胞、凝固纖維蛋白原和蛋白以得到血清,含有許多有助于細(xì)胞生長的成分,包括:如生長因子、附著因子、激素、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白、脂質(zhì)、糖類、維生素等。
優(yōu)質(zhì)的胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)方面通常優(yōu)于其他類型的血清,與新生牛和小牛血清相比,各類生長因子含量更為豐富。
胎牛血清還未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分最少;促細(xì)胞生長因子、促附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分也不同于其他幾類血清。
3. 胎牛血清的應(yīng)用
胎牛血清常用于增殖細(xì)胞系和原代培養(yǎng),如:干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等,被廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、靶標(biāo)/藥物發(fā)現(xiàn)、藥物開發(fā)和臨床研究。
NEST?胎牛血清標(biāo)簽上標(biāo)明存儲(chǔ)條件、批號和有效期,儲(chǔ)存條件為-20°C,保質(zhì)期為60個(gè)月。當(dāng)產(chǎn)品正確存儲(chǔ),可以保證最佳的產(chǎn)品性能。需要-20℃或干冰運(yùn)輸。
4. 胎牛血清的解凍方法
將血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小時(shí),使之緩慢部分溶解,然后再放在室溫下使之全溶。
注意:溶解過程中要每隔一段時(shí)間緩慢地?fù)u動(dòng)血清使之混勻。切記:避免37℃水浴。另解凍后的血清,不宜在4℃冰箱中放置過久。